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人皮膚成纖維HSF的運(yùn)輸和存儲(chǔ):
1、將1mL冷凍細(xì)胞懸液置于1.8ml冷凍管中,并置于裝有干冰的泡沫保溫箱中運(yùn)輸;接收細(xì)胞后,請(qǐng)盡快解凍并恢復(fù)細(xì)胞的培養(yǎng),如果不是立即進(jìn)行。在恢復(fù)操作中,冷凍的細(xì)胞可以在-80°C下保存1個(gè)月。
2、將T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基,然后在室溫下運(yùn)輸;接受細(xì)胞后,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞的生長狀態(tài)。如果培養(yǎng)瓶的鋪展率超過85%,請(qǐng)立即進(jìn)行繼代培養(yǎng),如果有更多的懸浮細(xì)胞,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶放在培養(yǎng)箱中過夜,以幫助不死的懸浮細(xì)胞再次粘附在壁上。
人皮膚成纖維HSF具有大的細(xì)胞體,弱嗜堿性的細(xì)胞質(zhì),橢圓形的大核,染色質(zhì)疏松和核仁淺色。在電子顯微鏡下,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富,游離核糖體發(fā)達(dá),高爾基復(fù)合體發(fā)達(dá),表明其具有合成和分泌蛋白質(zhì)的功能。成纖維細(xì)胞仍可以合成和分泌膠原纖維,彈性纖維,網(wǎng)狀纖維和有機(jī)基質(zhì)。由其合成的原膠原分子通過核酸內(nèi)切酶聚合和重排,形成具有64nm周期性條紋的膠原原纖維,就像成骨細(xì)胞合成和分泌的膠原原纖維一樣。膠原原纖維彼此結(jié)合以形成膠原纖維。
經(jīng)測(cè)試,人皮膚成纖維HSF由兩種類型的細(xì)胞合成和分泌的膠原纖維是I型膠原纖維,其形態(tài)和生化結(jié)構(gòu)均相同。纖維細(xì)胞處于成熟階段或靜止?fàn)顟B(tài),細(xì)胞體變小,梭形長,粗糙的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體不發(fā)達(dá),被稱為成纖維細(xì)胞。在創(chuàng)傷等因素的刺激下,某些成纖維細(xì)胞可以轉(zhuǎn)化為幼稚的成纖維細(xì)胞,其功能活性也得以恢復(fù),并在損傷后參與組織的修復(fù)。另外,在結(jié)締組織中,仍存在少量具有分化潛能的間充質(zhì)細(xì)胞,它們可以在傷口修復(fù)等條件下增殖并分化為成纖維細(xì)胞。當(dāng)成纖維細(xì)胞癌變時(shí),它們從扁平紡錘形變?yōu)榍蛐巍?/div>