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肝癌并不陌生,那么
人肝癌細(xì)胞HEPG2是什么呢,大家可能對(duì)這個(gè)并不了解,為了自己和家人的健康,讓我們來(lái)了解一下它是什么吧。HEPG2來(lái)源于一個(gè)15歲白人的肝癌組織,該細(xì)胞分泌多種血漿蛋白:清蛋白、α2-巨球蛋白、血纖維蛋白溶酶原、鐵傳遞蛋白等。該細(xì)胞能大容量培養(yǎng),乙肝表面抗原陰性,對(duì)G418有抗性,對(duì)人生長(zhǎng)激素有刺激反應(yīng)。
1、細(xì)胞培養(yǎng):人肝癌細(xì)胞HEPG2用含10%胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)基,放人37℃恒溫、5%COZ孵化箱中培養(yǎng)。
2、分選SP細(xì)胞:重懸細(xì)胞于預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中,濃度為1x109/L,加人Hoechst至終質(zhì)量濃度為5m留L,370C,90min孵育,對(duì)照組在Hoechst染色前加人終質(zhì)量濃度為50m擴(kuò)L的維拉帕米,孵育結(jié)束后重懸細(xì)胞于冰的Hanks平衡鹽,同時(shí)加人2m剔LPI以區(qū)分壞死細(xì)胞,下面所有實(shí)驗(yàn)都以經(jīng)流式細(xì)胞儀分選出的SP細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)組,對(duì)照組選取同代未經(jīng)分選的HepG2細(xì)胞。
3、非肥胖糖尿病/嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(NOD/SLID)鼠接種實(shí)驗(yàn):雄性NOD/SCID鼠(5周)每組各5只,經(jīng)分選所得SP細(xì)胞調(diào)整濃度至2x10'/L,對(duì)照組人肝癌細(xì)胞HEPG2調(diào)整濃度至2x106/L,分別將前述細(xì)胞懸液0.2ml注射于小鼠皮下,觀察成瘤情況,90d后處死小鼠,取皮下形成的腫瘤,比較其成瘤情況。